AVALIAÇÃO DO RENDIMENTO E DA ATIVIDADE CITOTOXIPOTENCIAL DO ÓLEO ESSENCIAL DE MARMELEIRO FRENTE A ARTEMIA SALINA

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DOI: https://doi.org/10.53934/9786585062046-85

Este trabalho foi escrito por:

Fabiana Augusta Santiago Beltrão ^*;Antônio Alef Pereira de Oliveira; Laíza Soliely Costa Gonçalves; Edvaldo  Mesquita Beltrão Filho; Max Quirino Rocha; Erivaldo Neves da Silva ; Pedro Victor de Oliveira Lemos 

* Fabiana Augusta Santiago Beltrão – Email: [email protected]

Resumo: Diferentes culturas das mais variadas localidades do mundo têm utilizado as plantas de diversas formas, pois conhecem e fazem uso de suas potenciais propriedades medicinais. Os compostos bioativos dos óleos essenciais possuem excelentes propriedades biológicas; no entanto, eles são quase sempre tóxicos em grandes quantidades. Neste sentido, o objetivo deste estudo foi determinar o rendimento e a toxicidade dos óleos essenciais de marmeleiro frente ao microcrustáceo Artemia salina. A extração do óleo essencial das folhas frescas de marmeleiro, em triplicata, foi obtida pelo método de Moraes, e o teste de concentração letal realizado com aplicação em Artemia salina, ambos realizados no realizado no Laboratório de Química da Universidade Federal da Paraíba, no Centro de Ciências Humanas Sociais e Agrárias. O óleo essencial das folhas de marmeleiro obtido pelo método de hidrodestilação apresentou um rendimento de 0,48%. Concluindo que a aplicação do óleo em Artemias com 50% de mortalidade em qualquer uma das concentrações testadas foram considerados tóxicos  (Dl 50).

Palavras–chave: bioatividade; óleo essencial; toxicidade

Abstract: Different cultures from the most varied locations in the world have used plants in different ways, as they know and make use of their potential medicinal properties. The bioactive compounds of essential oils have excellent biological properties; however, they are almost always toxic in large amounts. In this sense, the objective of this study was to determine the yield and toxicity of quince essential oils against the microcrustacean Artemia salina. The extraction of essential oil from fresh quince leaves, in triplicate, was obtained by the method from Moraes and the lethal concentration test carried out with application in Artemia salina, both carried out at the Chemistry Laboratory of the Federal University of Paraíba, at the Center for Social and Agrarian Human Sciences. The essential oil of quince leaves obtained by the hydrodistillation method showed a yield of 0.48%. Concluding that the application of the oil in Artemias with 50% mortality in any of the concentrations tested were considered toxic (Dl 50).

Keywords: bioactivity; essential oil; toxicity.

INTRODUÇÃO

Em nações em desenvolvimento onde há dependência do que se conhece como medicina popular, o uso de plantas como forma de tratamento medicamentoso é uma prática antiga e comum (1). Ao longo dos anos, houve um avanço significativo na pesquisa científica, incluindo estudos nas áreas químicas e farmacêuticas de plantas medicinais, em um esforço para criar novos compostos com propriedades terapêuticas (2).

São considerados compostos com excelente potencial biológico os óleos essenciais, dos quais são os mais encontrados os monoterpenos e os sesquiterpenos (3). As fontes primárias de óleos essenciais são folhas, rizomas, cascas ou sementes produzidas pelas plantas e obtidas através do metabolismo secundário e volátil (4). Estudos científicos estabeleceram que várias espécies de Croton produzem óleos essenciais, que são compostos voláteis, o que conferem às plantas um aroma agradável (6; 5; 7). Além de exibem uma ampla gama de características estruturais. Isso aumenta a probabilidade de que esses óleos essenciais sejam convertidos em novas drogas menos tóxicas, ampliando o arsenal farmacológico e alimentar do país, deslocando bens importados e industrializados e gerando significativo crescimento econômico (7).

No entanto, compostos bioativos são quase sempre tóxicos quando consumidos em grandes concentrações. Desta forma, a avaliação da letalidade em um organismo animal menos complexo pode ser usada para monitoramento rápido e fácil (8; 10).

Diante do exposto, o objetivo-se da presente pesquisa foi determinar o potencial toxicológico dos óleos essenciais da folha de Marmeleiro (Cróton Blanchetianus Baill)  frente ao microcrustáceo Artemia salina.

MATERIAL E MÉTODOS

 O óleo essencial das folhas frescas de marmeleiro foi extraído pelo método adaptado de Moraes et al. (1), realizado no Laboratório de Química da Universidade Federal da Paraíba, no Centro de Ciências Humanas Sociais e Agrárias. O óleo foi extraído a partir de 100g de folhas trituradas já secas, submersas em 1,8 litros de água destilada. O óleo essencial foi extraído por hidrodestilação em um aparelho do tipo Soxhlet adaptado, por 4 horas, a uma temperatura de 100°C, após a extração fez-se para remoção do excesso de água com sulfato de sódio anidro (Na2SO4) e condicionou o óleo obtido em frasco âmbar e armazenou sob refrigeração 4°C ± 1°C. Sendo analisado em triplicata.

Teste de letalidade em Artemia salina

O óleo essencial foliar de marmeleiro foi avaliado em um teste de letalidade com larvas de Artemia salina .Sendo aplicada uma série de diluições com concentrações (1000, 500, 250, 125, 62, 5 e 31, 25 g/ml ) e de solução de água do mar, contendo Tween 80.  Foram usadas para investigar a toxicidade do óleo essencial (OE) dez náuplios ​​em cada teste, e os sobreviventes foram registrados após 24 horas. Realizando três repetições de cada concentração, além de realizar uma série paralela de testes utilizando um grupo controle. O teste foi realizado no Laboratório de Química do Centro de Ciências Humanas, Sociais e Agrárias (CCHSA /UFPB).

Como medida de toxicidade do óleo, foi determinado usando o método probit 10 e o programa GraphPad Prism de software, com base na análise probit de Finney método (11), observando a concentração letal para 50% de mortalidade (LC₅₀₎ e intervalos de confiança de 95%.  A toxicidade foi medida em termos de CL₅₀ (concentração letal de 50% de naúplios) e de acordo com Dolabela (12), conforme Tabela 1.

Óleos ou extratos que não mostram 50% de mortalidade em qualquer uma  das concentrações testadas foi considerado não tóxico.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

            O óleo essencial das folhas de marmeleiro obtido pelo método de hidrodestilação apresentou um rendimento de 0,48% em relação ao peso do material vegetal utilizado (Tabela 2).

A quantidade de óleo obtido apresentou rendimento semelhante quando comparado ao do estudo de Medeiros et al. (9), que obtiveram rendimento de 0,36% ao extrair óleo essencial de Croton blanchetianus, este rendimento pode variar por vários fatores (extrínsecos e intrínsecos) da planta, assim como o período de sazonalidade durante a coleta das folhas.

Estudos de toxicidade utilizando Artemia salina foram sugeridos em muitos compostos com atividade biológica para determinar sua potencial aplicação terapêutica (PARRA et al., 2001).

No teste de toxicidade com as concentração de óleo essencial de marmeleiro, o mesmo apresentou toxicidade alta na menor concentração (31,25 ug/ml), podendo ser utilizado abaixo desta concentração em segurança, de acordo com Ramos et al. (14), caracteriza-se como um óleo tóxico

Em estudos utilizado o teste de toxicidade com Artemia salina a variação dos índices de mortalidade possuem percentual de 0-100%. Na qual no estudo de Medeiros et. al. (9), a dose letal para matar 50% das larvas (CL₅₀) foi calculada em concentração de óleo essencial de marmeleiro a 10,6 ppm. O que traz a importância desse teste para averiguar a toxicidade, principalmente em muitos compostos com atividade bioativa e assim determinar o seu potencial  para aplicação terapêutica (13).

Podemos ver pela curva GraphPad Prism (Figura 1), que a letalidade das larvas é diretamente proporcional à concentração do óleo essencial de testado, ou dito de outra forma , a letalidade das Artemias aumenta à medida que a concentração aumenta.

CONCLUSÕES

De acordo com os resultados obtidos neste estudo, o óleo essencial das folhas de marmeleiro após extração pelo método de hidrodestilação obteve um rendimento de 0,48%. O óleo essencial apresentou citotoxidade potencial de substâncias biologicamente ativa com propriedades tóxicas, apresentando alta toxicidade de acordo com o LC₅₀ calculado por meio do teste de toxicidade utilizando Artemia salina para concentração 31,25 ug/ml.

REFERÊNCIAS

1. MORAES, R. P.; CORREA, I. C.; VANIN, A. B.; OLIVEIRA, D. L. Potencial tóxico dos óleos essenciais de endro (Anethum graveolens) e nim (Azadirachta indica a. Juss) frente artemia salina. Brazilian Journal of Development, v. 5, n. 5, p. 3834-3838, 2019.

2. SILVA, G.; RANIERI, I.; DE MOURA, R. M. X. Revisão literária da Arnica Montanal: avaliação das propriedades e conhecimento do seu uso. In: XII Jornada Científica Faculdades Integradas de Bauru – FIB ISSN 2358-6044. 2017.

3. HYLDGAARD, M.; MYGIND, T.; MEYER, R. L. Essential oils in food preservation: mode of action, synergies, and interactions with food matrix components. Frontiers in microbiology, v. 3, p. 12, 2012.

4. GUERRA, A. M. N. M; SANTOS-SILVA, D.; SANTOS, P. S.; SANTOS, L. B. Teste de repelência de óleos essenciais sobre Callosobruchus   maculatus. Revista Brasileira  de Agropecuária Sustentável, Viçosa, v. 9, n. 3, p. 110-117, 2019.

5. PALMEIRA, J.R.S.F.; ALVES, V.L.; MOURA, F.S.; VIEIRA, L.F.A.; COSERVA, L.M.; LEMOS, R.P.L. Constituintes químicos das folhas de Croton sellowii (Euphorbiaceae). Revista Brasileira de Farmacognosia, vol.16, n.3, p.397-402, 2006.

6. RANDAU, K.P.; FLORÊNCIO, D.C.; FERREIRA, C.P.; XAVIER, H.S. Estudo farmacognóstico de Croton rhamnifolius H.B.K. e Croton rhamnifolioides Pax & Hoffm. (Euphorbiaceae). Revista Brasileira de Farmacognosia. Vol. 4. p. 89-96. 2004.

7. FERNANDES, D. N. M. Composição química, atividade antimicrobiana e antioxidante do óleo essencial de Croton tetradenius Baill (Euphorbiaceae). 2016. 74 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Ambientais), UESBA, Itapetinga: BA, 2016.

8. CANSIAN, R. L.; VANIN, A. B.; ORLANDO, T.; PIAZZA, S. P.; PUTON, B. M. S.; CARDOSO, R. I.; OLIVEIRA, D. Toxicity of clove essential oil and its ester eugenyl acetate against Artemia salina. Brazilian Journal of Biology, v. 77, p. 155-161, 2016.

9. MEDEIROS, J.A.M.; SILVA, G.S.; SILVA, I.S.A.; MELO, A.M.; LIMA, S.G.; BELTRÃO FILHO, E.M.; QUIRINO, M.R. Identificação dos constituintes químicos do óleo essencial de marmeleiro (Cróton blanchetianus baill) e avaliação de sua atividade citotoxipotencial frente a artemia salina leach. In: 54º Congresso  Brasileiro de Química. Natal RN, 2014.

10. SINTIM, H. Y.; BURKHARDT, A.; GAWDE, A.; CANTRELL, C. L.; ASTATKIE, T.; OBOUR, A. E.;  SCHLEGEL, V.  Hydrodistillation time affects dill seed essential oil yield, composition, and bioactivity. Industrial Crops and Products, v. 63, p. 190-196, 2015.

11. FINNEY, D. Em probit analisis; 3a ed., Cambridge University Press: Cambridge, l971.

12. DOLABELA, M. F. Triagem in vitro para atividade antitumoral e anti-Tripanossoma cruzi de extratos vegetais, produtos naturais e substancias sintéticas. Dissertação de Mestrado – UFMG, Belo Horizonte, 1997.

13. PARRA, A. L.; SILVA, Y. R. AND IGLESIA, B. L. Acute and subacute toxicity (28 days) of a mixture of ursolic acid and oleanolic acid obtained from Bouvardia ternifolia in mice. Phytomedicine 8: 395, 2001.

14. RAMOS, S. C. S.; OLIVEIRA, J. C. S.; CÂMARA, C. A. G.; CASTELAR, I.; CARVALHO, A. F. F. U.; LIMA-FILHO, J. V. Antibacterial and cytotoxic properties of some plant crude extracts used in Northeastern folk medicine. Rev. bras. farmacogn. [online], 19: 376-381, 2009.